產品貨號：DM5410
ELISA試劑盒技術流程 

 ELISA試劑盒需自備的設備及試劑    

1. 450±10nm濾光片的酶標儀(建議儀器使用提預熱)

2. 單道或多道微量加液器及吸頭

3. 稀釋樣品的EP管

4. 蒸餾水或去離子水

5. 吸水紙

6. 盛放洗液的容器

性能:
1．準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值，大于等于0.9900。
2．靈敏度：檢測濃度小于10 pg/ml。
3．特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4．重復性：板內、板間變異系數(shù)均小于15%。

ELISA試劑盒優(yōu)點：
1、高效、靈敏、特異的抗體；
2、重復性和可靠性高；
3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型；
5、可檢測指標齊全：細胞因子檢測、心肌梗塞檢測、內分泌檢測、肝纖維化檢測、自身免疫檢測、腫瘤標志物檢測、傳染病檢測、特種蛋白檢測、優(yōu)生優(yōu)育檢測等等；
6、價格優(yōu)惠，質量保證，限度的節(jié)省實驗經(jīng)費。

實驗步驟

1. 使用將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。

2. 標準品(凍干品)：每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管，每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。

注意事項劑盒的儲存及有效期

1. 未開封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意，收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液，終止液保存于4℃，其他試劑保存于-20℃。

2. 使用后的試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存，開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。

須知：

試劑盒內酶標條可拆卸，按實驗需求可分多次使用；使用后的剩余試劑盒建議在次實驗后1個月內使用完畢。產品過期時間以盒子上的標簽為準，保質期內所有組分都確保是穩(wěn)定的。

1、ELISA標準曲線；

2、詳細的實驗步驟；

3、完整的實驗報告（試劑耗材，實驗方法，實驗結果及結果說明）；
 

[樣本處理及要求]

1.  血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

3.  組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

4.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

注：標本溶血會影響后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

[需要而未提供的試劑和器材]

1.酶標儀（450nm）

2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒溫箱

4.蒸餾水或去離子水

ELISA檢測試劑盒承諾