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HL-60-LUC(人早幼粒白血病細胞-熒光素酶標記（STR鑒定正確）)
| 一、細胞基本屬性 | ||||
| 細胞名稱 | HL-60-LUC(人早幼粒白血病細胞-熒光素酶標記（STR鑒定正確）) | |||
| 細胞別稱 | HL-60-LUC；人早幼粒白血病細胞-LUC;人早幼粒白血病細胞--熒光素酶標記 | |||
| 種屬來源 | 人 | |||
| 組織來源 | 外周血；早幼粒細胞 | |||
| 生長特性 | 懸浮生長 | |||
| 細胞形態 | 淋巴母細胞樣 | |||
| 細胞代數 | p3-p8 | |||
| 背景介紹 | Luciferase HL-60細胞穩定表達螢火蟲熒光素酶。該細胞株性狀穩定，培養時不需要添加抗生素維持。可用作螢火蟲熒光素酶活性檢測中的陽性對照，也可用于活體動物成像實驗。 該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。 HL-60是一株早幼粒細胞。外周血白細胞來自一位患有急性粒-單核細胞白血病的36歲白人女性。 HL-60 自發分化，丁酸鹽、次黃嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1% to 1.5%)、放線菌素D和視黃酸可以促進分化。細胞表現出吞噬活性，并對趨化刺激有響應。致癌基因myc表達陽性。 | |||
| puro藥篩濃度 | 該細胞puro藥篩濃度為0.5ug/ml，培養過程中可不用再添加puro，如若擔心抗性隨著傳代時間降低，可定期用0.2ug/ml濃度puro維持。 | |||
| 生物安全等級 | 1 | |||
| 細胞規格 | 1×10?cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝 | |||
| 支原體檢測 | 無 | |||
| 保藏機構 | ATCC; CCL-240 BCRC; 60027 BCRJ; 0104 DSMZ; ACC-3 ECACC; 98070106 | |||
| 培養基 | 80%IMDM+20%FBS +PS | |||
| 培養條件 | 氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ | |||
| 凍存條件 | 無血清凍存液，液氮儲存 | |||
| 細胞貨期 | 1-2周 | |||
| 運輸方式 | 復蘇發貨（T25瓶免運輸費用）/ 凍存發貨（需加干冰運輸費用） 順豐快遞 | |||
| 供應限制 | 于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 | |||
| 特別說明 | 以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 | |||
二、細胞培養操作
1) 復蘇細胞：以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL完全培養基，培養過夜）。第三天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
a、細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
b、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
c、棄上清，沉淀細胞用12ml完全培養基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
d、待細胞完全貼壁后，觀察培養結果，之后進行換液培養或傳代。
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
b、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
c、用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
d、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉入液氮中進行保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
三、培養注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象 發生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由 客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的完全培養基重懸 細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養基 (灌液培養基) 不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培 養條件新配制的完全培養基來培養細胞。 收到細胞后次傳代建議 1：2 傳代 。
9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
僅用于科研，不能用于臨床診斷！所有產品僅供科研使用，不得用于人或動物的治療等任何其他用途，不為任何個人提供產品和服務。以實際收貨產品說明書為準，網站說明書僅供參考。
關鍵詞：HL-60-LUC細胞 HL-60-LUC HL-60-LUC(人早幼粒白血病細胞-熒光素酶標記（STR鑒定正確）)
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